原位雜交雜交液
(一)雜交液內除含一定濃度的標記探針外,還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
(二)雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加,可以減低探針與組織標本之間的靜電結合。
(三)賈酰胺可使雜交溫度降低,所以雜交液中加入適量的甲酰胺,可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態結構的破壞以及標本的脫落。
(四)硫酸葡聚糖能與水結合,從而減少雜交液的有效容積,提高探針有效濃度,以達到提高雜交率的目的。
生物領域應用原位雜交技術的例子:
基因表達和調控研究:原位雜交技術可以用于研究基因表達的調控機制。例如,可以標記特定基因的探針,檢測該基因在不同環境、不同生長條件下的表達情況,進而研究其表達調控機制。
細胞分化與發育研究:在細胞分化與發育研究中,原位雜交技術常被用于檢測和定位特定基因的表達情況,進而了解細胞分化的過程和機制。例如,可以標記與細胞分化相關的基因探針,檢測該基因在不同組織、不同發育階段的表達情況。