原位雜交技術(shù)(in situhybridization)是以標(biāo)記的核酸分子為探針,在組織細(xì)胞原位檢測(cè)特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標(biāo)記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細(xì)胞中的互補(bǔ)核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以自顯影或細(xì)胞化學(xué)方法對(duì)標(biāo)記探針進(jìn)行探測(cè),從而在細(xì)胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測(cè)cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標(biāo)本,包括哺乳動(dòng)物、爬行動(dòng)物、菌、植物標(biāo)本。也可以檢測(cè)組織芯片。
原位雜交技術(shù)在許多領(lǐng)域都有應(yīng)用,以下是其中幾個(gè)具體應(yīng)用:
細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué):在細(xì)胞生物學(xué)和發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于研究基因的表達(dá)和定位。例如,通過標(biāo)記特定基因的探針,可以在細(xì)胞或組織中檢測(cè)特定基因序列的存在和分布,進(jìn)而了解基因在細(xì)胞分化、發(fā)育和功能中的作用。
基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究:原位雜交技術(shù)也可用于基因組學(xué)和遺傳學(xué)研究。例如,通過標(biāo)記多個(gè)基因探針,可以檢測(cè)基因組中的多個(gè)基因序列,從而進(jìn)行基因定位、基因表達(dá)譜分析、基因突變檢測(cè)等研究。
病毒學(xué)和病原微生物研究:在病毒學(xué)和病原微生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)常被用于檢測(cè)和定位病毒、細(xì)菌等病原微生物。例如,通過標(biāo)記特異性或核酸探針,可以檢測(cè)組織中病原微生物的存在、情況以及分布特征,從而為疾病的預(yù)防、診斷和提供依據(jù)。
總之,原位雜交技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、基因組學(xué)、遺傳學(xué)、病毒學(xué)和病原微生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象、探究疾病機(jī)制和提供了有力的技術(shù)支持。