原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補(bǔ)配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個(gè)重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。
植物染色體原位雜交是一種重要的分子生物學(xué)技術(shù),它可以用來研究植物基因組的結(jié)構(gòu)和功能。該技術(shù)利用DNA探針與目標(biāo)DNA序列的互補(bǔ)性結(jié)合,通過熒光或性標(biāo)記來檢測目標(biāo)DNA序列在染色體上的位置和數(shù)量。
植物染色體原位雜交技術(shù)的基本原理是將DNA探針標(biāo)記上熒光或性同位素,然后將其與目標(biāo)DNA序列進(jìn)行雜交。在雜交過程中,探針與目標(biāo)DNA序列互補(bǔ)結(jié)合,形成穩(wěn)定的雙鏈DNA分子。隨后,通過熒光或性同位素探測技術(shù),可以檢測到目標(biāo)DNA序列在染色體上的位置和數(shù)量。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括:
檢測物種或品種特異性:通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種:通過植物原位雜交技術(shù)可以檢測到不同品種之間基因表達(dá)的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。例如,通過將特定的外源基因?qū)氲街参锛?xì)胞中,然后利用原位雜交技術(shù)檢測該基因在植物細(xì)胞中的位置和表達(dá)情況,為遺傳育種提供重要的參考信息。