原位雜交技術(shù)的原理是什么?有何用途
原位雜交技術(shù)的原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有性或非性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列要具備3個重要條件:組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物(曾呈奎等2000)。
植物染色體原位雜交技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛。例如,它可以用來研究植物基因組的結(jié)構(gòu)和功能,包括基因定位、染色體重組、基因表達(dá)和基因組演化等方面。此外,該技術(shù)還可以用來檢測植物中的染色體異常,如染色體缺失、重復(fù)和易位等。
植物染色體原位雜交技術(shù)的優(yōu)點在于它可以直接觀察到染色體上的目標(biāo)DNA序列,而不需要進(jìn)行PCR擴增或測序等操作。此外,該技術(shù)還可以同時檢測多個目標(biāo)DNA序列,從而提高檢測效率和準(zhǔn)確性。
熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點:
可多重染色:利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針,可以實現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交,從而同時檢測多個序列,提高實驗效率了。
高度創(chuàng)新性和性:FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢。