菌落的裂解及DNA結合于纖維素濾膜
（1） 在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，將濾膜放到小洼上，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤，讓濾膜留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復步驟（1）。
（3） 吸干濾膜，將濾膜轉移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復一次該步驟。
（4） 吸干濾膜，把它轉移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時，固定DNA。
（6） 將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。
怎樣保證原位雜交實驗操作時的溫度?
建議儀器操作，人工操作的話要注意：
（1）對熒光原位雜交操作過程中可能使用的一些儀器進行溫控檢查，不符合要求的進行更換。
（2）盡可能地保持環境溫度在20度以上。
（3）針對需要預熱以達到要求溫度的試劑，在使用前必須使用溫度計對其進行測溫。
（4）同時檢測的樣本不超過4塊，操作一定要迅速，實驗人員要注意一些小部件的溫度，尤其是在冬季。
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