湖北GISH-武漢貝科新肽科技公司
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營(yíng)產(chǎn)品:原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
- 公司地址:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)
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在ISHH,整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期是比較長(zhǎng)的,實(shí)驗(yàn)程序也比較繁雜,而雜交在ISHH整個(gè)實(shí)驗(yàn)中可被認(rèn)為是“短兵相接”的一步。雜交前的一切準(zhǔn)備工作如增加組織通透性都是為了在雜交這一步驟中核酸探針能進(jìn)入細(xì)胞或組織與其內(nèi)的靶核苷酸相結(jié)合。因此,雜交是ISHH中關(guān)鍵的而且是重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。雜交是將雜交液滴于切片組織上,加蓋硅化的蓋玻片,防止孵育過程中的高溫(50℃左右)導(dǎo)致雜交液的蒸發(fā)。為保證雜交所需的濕潤(rùn)環(huán)境,可將其放在盛有少量5×SSC或2×SSC(standard saline citrate, SSC)溶液的硬塑料盒中進(jìn)行孵育。雜交液的成分和預(yù)雜交液基本相同,所不同的是加入了標(biāo)記的核酸探針和硫酸葡聚糖。

根據(jù)核酸探針標(biāo)記物的種類分別進(jìn)行自顯影或利用酶檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行不同顯色處理。細(xì)胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進(jìn)行半定量的測(cè)定,如自顯影可利用人工或計(jì)算機(jī)輔助的圖象分析檢測(cè)儀(computer-assisted image analysis)檢測(cè)銀粒的數(shù)量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細(xì)胞或組織可利用酶檢測(cè)系統(tǒng)顯色,然后利用顯微分光光度計(jì)或圖像分析儀對(duì)不同類型和數(shù)量的核酸的顯色強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)。

植物原位雜交的應(yīng)用包括:
研究基因表達(dá):通過觀察熒光信號(hào)的位置和數(shù)量,可以確定目標(biāo)基因在植物組織中的表達(dá)模式和位置。
染色體定位:將目標(biāo)基因與染色體中的特定位置進(jìn)行比較,可以確定目標(biāo)基因在染色體中的位置和分布。
基因:通過原位雜交技術(shù),可以確定目標(biāo)基因的序列和位置,為基因提供重要的參考信息。
檢測(cè)物種或品種特異性:通過原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)出不同物種或品種之間基因表達(dá)的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種:通過原位雜交技術(shù)可以檢測(cè)出不同品種之間基因表達(dá)的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。