原位雜交雜交液
（一）雜交液內除含一定濃度的標記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
（二）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標本之間的靜電結合。
（三）賈酰胺可使雜交溫度降低，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態結構的破壞以及標本的脫落。
（四）硫酸葡聚糖能與水結合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達到提高雜交率的目的。
在原位雜交過程中，需要使用標記的核酸探針，通常是在性核素或非性物質中標記的。這些探針可以通過不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，或者通過使用生物信息學方法設計和合成新的探針。
在進行原位雜交時，細胞或組織需要固定在適當的支持物上，例如載玻片。然后，探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交，通常是在加熱條件下進行的。接下來，通過洗滌和顯影步驟去除未結合的探針和信號增強劑，后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。
FISH技術的基本步驟包括探針制備、樣品預處理、探針與樣品的雜交、信號檢測和圖像分析等。在探針制備過程中，使用熒光標記物代替同位素標記物來標記探針。在樣品預處理過程中，細胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質等操作都是必要的，以提高探針與目標序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中，探針與樣品中的目標序列進行互補性雜交，形成可檢測的熒光信號。在信號檢測和圖像分析過程中，使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測熒光信號并獲取高分辨率的細胞圖像。
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