預(yù)雜交
1)每個管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。
2)用等體積的HYB+取代HYB-。
3)60℃水浴,預(yù)雜交4小時以上。
雜交
1)吸去預(yù)雜交的HYB+,加上100ul已加入探針的HYB+溶液(探針濃度約為1ng/ul)..
2)60℃ 溫浴過夜。
注:雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等,溫度越低,探針結(jié)合越好,溫度越高,背景越小。
原位雜交技術(shù)還在以下生物領(lǐng)域有應(yīng)用:
生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué):在生態(tài)學(xué)和環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)可以用于研究生物與環(huán)境之間的相互作用。例如,通過標記特定基因的探針,可以檢測環(huán)境中微生物種群的分布和變化,進而研究其對環(huán)境的影響和作用。
進化生物學(xué):在進化生物學(xué)領(lǐng)域,原位雜交技術(shù)可以用于研究物種之間的遺傳差異和進化關(guān)系。例如,通過比較不同物種之間基因序列的差異,可以揭示物種之間的親緣關(guān)系和進化歷程。
生物領(lǐng)域應(yīng)用原位雜交技術(shù)的例子:
物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究:在物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)研究中,原位雜交技術(shù)可以用于檢測物種之間的親緣關(guān)系和進化歷程。例如,可以比較不同物種之間特定基因序列的差異,進而研究它們的親緣關(guān)系和進化歷程。
原位雜交技術(shù)在基因表達和調(diào)控、細胞分化與發(fā)育、研究和物種進化與系統(tǒng)發(fā)生學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用價值,為深入探究生命現(xiàn)象、促進生物技術(shù)的發(fā)展提供了有力的技術(shù)支持。