把濾膜放在紙巾上于室溫晾干后，把濾膜（編號面朝上）放在一張保鮮膜上，并在保鮮膜上作幾個不對稱的標記，以使濾膜與性自顯影片位置對應。
用第二張保鮮膜蓋住濾膜。加光片并加上增感屏于-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后，在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置，同時在不對稱分布點的位置上作出標記。可從底片上取下透明紙，通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。
原位雜交雜交液
（一）雜交液內除含一定濃度的標記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
（二）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標本之間的靜電結合。
（三）賈酰胺可使雜交溫度降低，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態結構的破壞以及標本的脫落。
（四）硫酸葡聚糖能與水結合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達到提高雜交率的目的。
原位雜交技術的應用領域
原位雜交技術在醫學、農業和工業等領域都有廣泛的應用。在醫學方面，原位雜交技術可用于檢測癌細胞、病毒和細菌等致病微生物，幫助醫生制定的診斷和方案。在農業方面，原位雜交技術可用于基因定位、品種鑒定和遺傳育種等領域，提高農作物的產量和品質。在工業方面，原位雜交技術可用于檢測基因工程產品中的外源DNA，保證產品的安全性和穩定性。
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