武漢貝科新肽公司(圖)-熒光原位雜交-湖北原位雜交
武漢貝科新肽科技有限公司
- 主營產品：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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在研究DNA分子原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，能過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點，應用帶有標記的（有性同位素，如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質）DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細胞內待測核酸（RNA或DNA）片段進行雜交，然后可用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位
這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期，由于核酸分子雜交的特異性高，并可定位，因此該技術已被廣泛應用，例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便；同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸，對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保持組織與細胞的形態，更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。
熒光原位雜交（FISH）技術具有以下優點：
高特異性：熒光探針的合成是定向的，保證了雜交過程的特異性，可以有效地降低非特異性雜交和背景干擾。
高靈敏度：熒光信號的檢測比性信號的檢測更靈敏，可以檢測出低拷貝數的DNA序列，甚至可以檢測單個基因序列。
快速簡便：FISH技術操作簡便，雜交過程可以在數小時或數天內完成，而且不需要過于復雜的設備，便于在實驗室開展。
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