為什么不先對一個基因做預測,在預測的結果上直接做共定位?
不同的預測網站有不同的計算方法,同一個基因在不同的預測網站也可能得出不同的定位結果。另外所有的結果都應是基于實驗得到的,對于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推薦先做普通定位,根據普通定位的結果再決定做哪種細胞器的共定位。
為什么有的基因做原生質體轉化時熒光蛋白不亮?
不同物種的細胞可能對基因表達有影響,當在一種材料的原生質體中觀察不到熒光時,可以考慮換一種受體材料。另外,如果是分泌蛋白,在原生質體中無法觀察到熒光,此時可以考慮注射葉片來觀察熒光。
拍攝時為什么有明場通道?
(1)顯示細胞狀態,有活力的原生質體細胞應該是飽滿圓潤的,變形或破碎的細胞說明此時細胞不是適狀態或細胞已。
(2)顯示熒光確實是細胞內蛋白表達的,而不是細胞碎片及雜質產生的雜光。
GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發出綠色熒光,從而可以地定位蛋白質的位置。綠色螢光蛋白(GFP)是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質,從藍光到紫外線都能使其激發,發出綠色熒光。通過基因工程技術,綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉進不同物種的基因組,在后代中持續表達,并且能根據啟動子特異性地表達。
使用GFP必須構建融合蛋白載體,并在轉染之后有效表達。這樣,若在熒光顯微鏡下看到細胞內某一部位存在GFP信號,說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達到了確定某物質亞細胞定位的目的。
亞細胞定位方法:深入探索細胞內部的關鍵技術
在生命科學領域,亞細胞定位是一種關鍵技術,用于研究細胞內蛋白質、基因和其他分子的位置和功能。通過確定這些成分在細胞內的具體位置,科學家可以更好地理解它們的作用和相互關系。本文將介紹亞細胞定位的基本概念和方法。
亞細胞定位的意義
亞細胞定位是一種研究細胞內分子和蛋白質位置的技術,對于理解細胞結構和功能至關重要。通過這種技術,科學家可以確定蛋白質、基因和其他分子在細胞內的具體位置,從而更好地理解它們的作用和相互關系。此外,亞細胞定位還可以幫助科學家發現新的靶點,為研發提供重要的信息。