一. 原位雜交天
1. 重新水化和固定
1） 吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分鐘。
2） 置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘
3） 置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復一次
4） 置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘
5） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
蛋白酶處理與后固定（本實驗不做此步）
1） 用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節以下的胚胎不處理，5體節到24小時的胚胎處理3分鐘，24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發育時間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織，以便于雜交。
2） 用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。
3） 用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。
4） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
原位雜交技術在其他生物領域也有廣泛的應用，例如：
植物學研究：在植物學研究中，原位雜交技術可以用于檢測和定位特定基因的表達，研究基因組結構和進化。此外，還可以應用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學研究：在微生物學領域，原位雜交技術可以用于研究細菌、病毒等微生物的基因表達和定位，以及它們在環境中的分布和相互作用。例如，通過標記特異性探針，可以檢測腸道微生物群落中的特定，研究其在人體健康和疾病發生中的作用。
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